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Tunel染色分析

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基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP),從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick

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更新時間:2020-05-14
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基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP),從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。

TUNEL或缺口翻譯法實際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法,對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,能準確的反應(yīng)細胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細胞和從組織中分離的細胞的細胞凋亡測定,并可檢測出極少量的凋亡細胞,靈敏度遠比一般的組織化學(xué)和生物化學(xué)測定法要高,因而在細胞凋亡的研究中已被廣泛采用。

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